葉酸測定用培養基的應用

應用

葉酸干酪培養基用于葉酸的微生物法測定。干酪乳桿菌（ATCC 7469）為測定用菌。

培養基組分

成分                                     克/升

無維生素酸水解酪蛋白                 10.000

葡萄糖                               40.000

醋酸鈉                               40.000

磷酸氫二鉀                           1.000

磷酸二氫鉀                           1.000

DL-色氨酸                            0.200

天門冬酰胺                           0.600

抗壞血酸                             4.000

L-胱氨酸鹽酸鹽                       0.500

硫酸腺嘌呤                           0.010

尿嘧啶                               0.010

黃嘌呤                               0.020

脫水山梨糖醇單油酸酯絡合物           0.100

還原型谷胱甘肽                       0.005

硫酸鎂                               0.400

氯化鈉                               0.020

硫酸亞鐵                             0.020

硫酸錳                               0.015

核黃素（維生素B2）                   0.001

對氨基苯甲酸（PABA）                0.002

鹽酸吡哆醇                           0.004

鹽酸硫胺素                           0.0004

泛酸鈣                               0.0008

煙酸                                 0.0008

生物素                               0.00002

zui終pH值 (25°C)                     6.7±0.2

質量控制

Ø外觀——米黃色至黃色均一自由流動粉末

Ø制備好的培養基顏色和透明度——淡琥珀色透明溶液，可能有輕微沉淀

Ø配比濃度——在25°C下9.4%w/v(8.5g/100ml水）水溶液，pH值為6.7±0.1

ØpH值——6.60-6.80

配置

稱取9.4g干粉培養基溶于100ml蒸餾水，加入50mg抗壞血酸。加熱至沸騰使培養基*溶解。測定時，分裝至每管為5ml培養基（包含標準品和待測樣品）。加蒸餾水，使總體積達到10ml。高壓消毒15磅121°C 5分鐘。立即冷卻。

培養反應

采用干酪乳桿菌（ATCC 7469）進行葉酸的微生物法測定。35-37°C孵育16-18小時。

生長狀況

可獲得良好的生長。隨著測定管葉酸標準品濃度升高（即 0, 0.1,0.2, 0.4, 0.6, 0.8,1ng），干酪乳桿菌生長逐漸遞增，伴隨著620nm處吸光度的增加。

文獻

1. Flynn, Williams, ODell and Hogan, 1951, Anal. Chem., 23, 180.

2. Baker, Herbert, Frank, Pasher, Hunter, Wasserman and Sobotka, 1959,Clin. Chem., 5, 275.

3. Waters and Mollin, 1961, J. Clin. Path., 14, 335.