微生物法測定葉酸含量的改進

葉酸是乳酸桿菌生長的必需營養(yǎng)素，微生物法檢測葉酸是利用乳酸桿菌生長速度與葉酸含量相關的原理建立的。與其他葉酸檢測的方法相比，微生物法具有許多優(yōu)點：樣品預處理簡單、對設備要求不高、成本低廉等。

許多機構都將微生物法作為葉酸分析的標準方法，我國國家標準《嬰幼兒配方食品和乳粉通用檢驗方法》中測定葉酸的方法即為微生物法。1988 年 Horrne 等應用 96 孔細胞培養(yǎng)板以干酪乳酸桿菌(Lactobacillias Casei)對葉酸進行微量檢測，將甘油冷凍保存乳酸桿菌與96孔酶標板相結合，使得測定時間大為縮短。菌株對多數葉酸形式反應相似，能測定單和多谷氨酸葉酸，靈敏度很高，能達到ng 水平，具有較高的靈敏度和重現(xiàn)性。

這一方法對菌種的處理、分裝和保存，以及操作過程都作了重大改進，已被認為是目前可靠、簡便、迅速和微量檢測葉酸的方法。

96 孔板微生物法測葉酸能夠獲得準確、可靠、重復性好的結果。稀釋倍數對測定結果影響不大，結果穩(wěn)定。考慮其成本低廉，樣本預處理簡單以及對設備要求不高等優(yōu)點，適合于大批量測定，可用于大樣本的血液流行病學研究。此方法還可用于其他生物組織和食品中葉酸含量的測定，這對國內開展葉酸檢測有著較大的意義。

應用96孔板法測定葉酸含量時，選擇測定用葉酸培養(yǎng)基，這里推薦的是上HiMedia公司生產的葉酸測定用培養(yǎng)基（貨號：M543），該培養(yǎng)基由Himedia Laboratories生產，嚴格遵循標準，國產葉酸培養(yǎng)基含有痕量葉酸，易導致測定結果偏高，實驗準確性比較差，HiMedia葉酸測定用培養(yǎng)基有認證的GMP，CE和FDA，ISO9001，ISO13485等證書，成分符合《GB5009.211-2014 食品安全國家標準 食品中葉酸的測定》，測定結果準確性高。