細(xì)胞體外培養(yǎng)應(yīng)注意的方面

細(xì)胞培養(yǎng)是很重要的一門技術(shù)。其培養(yǎng)效果受到多方面影響，可匯總?cè)缦拢?/span>

1、溫度。細(xì)胞生長(zhǎng)需要適宜的溫度。通常來(lái)說(shuō)，人和哺乳動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)溫度要在35-37℃，鳥類細(xì)胞培養(yǎng)在38.5℃較好，鼠類細(xì)胞在34℃適宜生長(zhǎng)。細(xì)胞對(duì)低溫的耐受力比高溫強(qiáng)。

2、分離方法

常用的分離方法有組織塊分離法和酶消化分離法。也有使用抗體或磁珠包被的抗體分離細(xì)胞。

3、培養(yǎng)液

1）血清：細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)血清的濃度要控制在5%~20%，過(guò)高或過(guò)低的血清濃度都不利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。當(dāng)然，也可以使用特別配制的商品化的無(wú)血清培養(yǎng)基。

2）激素和生長(zhǎng)因子：不同的細(xì)胞需要不同的激素和因子。常見(jiàn)有：雌二醇、孕酮、表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子。許多激素和因子對(duì)細(xì)胞有促增殖、分化作用。

3）抗生素：常用的抗菌素是青霉素和鏈霉素。此外,卡那霉素、新霉素、兩性霉素、氯霉素、潮霉素都可以防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌和真菌的感染。

4）支持物：有些貼壁細(xì)胞需要特定的支持物。常見(jiàn)的支持物有滋養(yǎng)細(xì)胞或生長(zhǎng)基質(zhì)（如膠原等）。

4、接種的細(xì)胞密度：細(xì)胞密度過(guò)高和過(guò)低均不利于細(xì)胞生長(zhǎng)。

培養(yǎng)液的pH值：不同種動(dòng)物或是同一種動(dòng)物的不同部位對(duì)pH的要求各不相同。一般情況下，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的pH值一般在7.2-7.4。除文獻(xiàn)報(bào)道外，自己也可進(jìn)行摸索。如培養(yǎng)瓶蓋已松口，與外界氣體存在交換，培養(yǎng)箱內(nèi)的CO2濃度以及培養(yǎng)液中的緩沖鹽成分及濃度也可影響培養(yǎng)液的pH值。

品名：Ausbian精制新生牛血清

貨號(hào)：VS500N

批號(hào)：1712A

規(guī)格：500ml/瓶

市場(chǎng)價(jià)：1600元

歡樂(lè)價(jià)：800元

*活動(dòng)：買10瓶送3瓶，100瓶送40瓶

上海締一生物提供的Ausbian精制新生牛血清(γ照射)，是在新西蘭政府獸醫(yī)管理局監(jiān)管下的出口注冊(cè)屠宰場(chǎng)采集的。血清經(jīng)過(guò)0.22微米過(guò)濾和15kGy的gamma射線照射，減少了存在微生物的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)檢測(cè)過(guò)細(xì)胞毒效應(yīng)，確保沒(méi)有病毒。在病毒分離方面，均未檢出BVD（牛病毒性腹瀉病毒） 、PI-3（牛副流感病毒3型）、IBR（牛傳染性鼻氣管炎） ，質(zhì)量有保證，且價(jià)格正在優(yōu)惠期。

參考文獻(xiàn)

黃蘭蘭,等. 影響動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)因素. 黑龍江動(dòng)物繁殖. 2005,13(4):16-19