梭菌顯色培養(yǎng)基的應(yīng)用

產(chǎn)氣莢膜梭菌( Clostridium perfringens) 是一種革蘭陽性厭氧菌，能夠引起食物中毒和壞死性腸炎等疾病。該菌是臨床上氣性壞疽病原菌中常見的一種梭菌，在體內(nèi)能形成莢膜，能分解肌肉和結(jié)締組織中的糖，產(chǎn)生大量氣體，從而導(dǎo)致組織嚴重氣腫，繼而影響血液供應(yīng)，造成組織大面積壞死。美國疾病預(yù)防控制中心數(shù)據(jù)顯示，產(chǎn)氣莢膜梭菌已成為繼彎曲菌和沙門菌之后的又一大引起細菌性食物中毒的常見致病菌。

產(chǎn)氣莢膜梭菌也是一種重要的飲用水指示菌，我國《食品安全國家標準 飲用天然礦泉水檢驗方法》GB8538—2016規(guī)定，天然礦泉水產(chǎn)品和水源水中必須檢測產(chǎn)氣莢膜梭菌。

目前國內(nèi)對產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢測主要利用的是傳統(tǒng)的生化培養(yǎng)方法，如利用液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT)、亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ) (SPS)以及胰?-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)進行分離培養(yǎng)，步驟較多且需要大量復(fù)雜的確認實驗，整個過程至少需要 4天時間，不利于檢測部門及時報告結(jié)果 ，嚴重影響產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測的效率及準確性。

梭菌顯色培養(yǎng)基（貨號：M2026，HiCrome™ Clostridial Agar Base）【需添加劑：產(chǎn)氣莢膜桿菌添加劑II（貨號：FD012，Perfringens Supplement II）】根據(jù)該菌產(chǎn)生特異性酶，從而快速對產(chǎn)氣莢膜梭菌進行定性和定量分析。與傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比，產(chǎn)氣莢膜梭菌顯色培養(yǎng)基具有更高的準確性和更快的檢測速度，厭氧條件下35-37℃孵育24-48小時，即可觀察接種反應(yīng)（如下圖）。產(chǎn)氣莢膜梭菌顯色培養(yǎng)基利用該菌產(chǎn)生特異性酶，其特異性和靈敏度均較高，在初級分離中就可以對產(chǎn)氣莢膜梭菌進行分離與鑒定。

培養(yǎng)基中的胰蛋白胨提供必需的營養(yǎng)素，主要是氮源化合物。酵母提取物作為B族維生素的來源。葡萄糖是可發(fā)酵的碳水化合物。硫乙醇酸鈉是還原劑，有助于產(chǎn)生低氧還電位，從而促進梭菌的生長。此外，培養(yǎng)基通過添加額外成分，能很好地支持梭菌屬的繁茂生長。而選擇性添加劑可以抑制其他腸道細菌生長繁殖。

接種梭菌瓊脂的理想方法是用樣品（在管中）直接接種在無菌冷卻的培養(yǎng)基上，或者劃線接種。

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