大腸桿菌O157選擇性顯色培養基（國標）

原理

腸出血性大腸桿菌又名為產Vero細胞毒素的大腸桿菌（VTEC/EHEC）。盡管有許多血清型大腸桿菌產Vero細胞毒素（3），但大腸桿菌O157:H7是導致人類感染的常見的一種。它有幾種不常見的生化特性可用于鑒定。它屬于僅少數的beta葡萄糖醛酸酶（-）,24小時內不發酵山梨醇或鼠李糖。它們可從接種到含山梨醇而非乳糖的培養基的糞便標本中分離出來。

該款顯色培養基采用植物源蛋白胨，以取代動物源，避免了BSE/TSE風險。它基于 Rappaport 和Henigh（1）描述的配方而成。培養基含山梨醇和顯色混合劑，不含乳糖和指示劑染料。顯色劑被大腸桿菌O157：H7 特異性裂解，產生深紫至洋紅色。普通大腸桿菌形成藍綠色菌落。

培養基中的HiVeg的水解物和酵母粉提供碳源、氮源營養和長鏈氨基酸、維生素和其他生長營養。氯化鈉維持滲透壓平衡。添加劑使培養基更具有選擇性（2）。添加劑中的亞碲酸鉀選擇性抑制氣單胞菌和普羅威登菌。添加劑中的新生霉素抑制革蘭陽性菌。月桂基硫酸鈉抑制伴隨的革蘭陽性菌群。

培養基成分

組成                                G/L

HiVeg的水解物                   5.000

酵母粉                           3.000

山梨醇                           7.000  

合成離子活性劑1號         1.500

月桂基硫酸鈉                  0.100

顯色混合劑                     0.250

瓊脂                              15.000

終pH（25°C） 6.8±0.2

配制

31.85g溶于990ml蒸餾水，加熱至沸使*溶解。高壓滅菌后，冷卻至45-50℃，無菌加入復溶的添加劑（貨號FD187，先用10ml蒸餾水復溶）。混勻并傾注平板。

質量控制

外觀：奶油色至黃色均一自由粉末

成膠性: 牢固，與1.5%瓊脂相當

制備好的培養基顏色和透明度：在平皿中為淺琥珀色，透明至輕微不透明凝膠

配比反應：25°C下3.18% w/v水溶液，pH值為6.8±0.2

pH值要求：6.60-7.00

培養反應：

加入添加劑（貨號FD187）后，在35-37°C培養18-24小時，觀察如下：

參考文獻

1.Rappaport F.and Henigh E.,1952,J.Clin.Pathol.,5:361.

2.Zadik P.M.,Cahpman P.A.and Siddons C. A.,1993,J.Med.Microbiol.,39,155-158.

3.Smith and Scottland,1988,J.Med.Microbiol.,26:77-85