人骨髓間充質干細胞的培養

人軟骨損傷后，可用軟骨組織工程進行軟骨缺損修復。軟骨可由間充質干細胞分化而來。因而，間充質干細胞的培養和分化具有重要作用。

間充質干細胞（MSC）可以2×10的5次方／cm2的密度接種于特定的培養液(低糖DMEM，含15％FBS，100u/L氨卡青霉素，100 mg／L鏈霉素，250 mg／L兩性霉素)中，置于37℃、5％CO2和飽和濕度的孵箱內培養。3 天后更換培養液，小心棄去未貼壁細胞。以后每3天換液一次。

MSC體外擴增時，是待細胞長至鋪滿瓶底80％時，用0.1％胰蛋白酶和0.01％ EDTA(1:1)消化傳代，再以(6～8)×10³／cm2的密度接種傳代培養。以后各代均以此密度傳代擴增。

一些廠家已提供間充質干細胞無血清培養基，但價格不菲。也可考慮用質量較好的胎牛血清加DMEM進行培養。

質量較高的胎牛血清會非常適合干細胞的培養。它被眾多國家重點實驗室和細胞典藏項目長期選擇。下面這個品牌的血清供參考。

Ausbian®特級胎牛血清

Ausbian Fetal Bovine Serum，Sterile

規格：500ml/瓶    

貨號：VS500T/WS500T

產品描述

Ausbian®特級胎牛血清是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段，血中含有豐富的生長發育因子，非常適合各種細胞的培養。

所有Ausbian®特級胎牛血清出廠前均應經過嚴格質控，并附有詳細的《檢測報告》，檢查指標齊全，如理化檢查、外源因子檢查和促細胞生長能力等。

Ausbian®胎牛血清均在澳洲當地政府獸醫部門的監督下從注冊的出口屠場采集，符合動物協會要求。

Ausbian特級胎牛血清的優勢是：

1、精選內毒素更低批次（≤3EU/ml），使細胞更健康，培養更順利。干細胞對內毒素非常敏感，如果血清中內毒素≥3EU/ml時，干細胞很容易死亡。因此，挑選更低的內毒素，是保證實驗順利的第yi步。

2、七次無菌過濾，后三次為0.1 µm無菌過濾處理。

3、進行全面的細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測，保證安全性。

4、提供試用服務，養細胞更放心。

5、每個批次產量為2000-3000瓶，試用滿意的實驗室批號優先鎖定，保證大多數項目兩年不需換批次，細胞試驗數據穩定。

6、每年按序推出多個新鮮生產批次，平行供應，倉儲穩定。

7、Viansaga的防偽標簽，保證不會有假貨。保證了實驗的順利，也避免了假貨造成的成本損失。

總之，胎牛血清在細胞培養成分中占有重要位置，應選用質量好的胎牛血清，千萬不可圖便宜。

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