如何正確試用胎牛血清

【胎牛血清】是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基。

它是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段，血中含有豐富的生長發(fā)育因子，非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。

因此，如何在使用過程中保護(hù)這些因子的活性，達(dá)到大的細(xì)胞培養(yǎng)效果，就需要正確地使用胎牛血清。

正確地使用胎牛血清可分為以下四個方面：

1. 正確儲存，避免反復(fù)凍融

1) 血清在-20°C凍存。

2) 血清避免反復(fù)凍融，以免降低因子活性。如一次用不完，應(yīng)進(jìn)行分裝。

3) 血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”，配好的培養(yǎng)液，應(yīng)于一周內(nèi)用完。

4) 血清避免在4°C或更高溫度靜置過久，否則會破壞血清中有效活性成分，影響血清品質(zhì)。

 

2. 正確的融化

上流行的【血清融化三步法】可大限度地保存血清中因子的活性，不會產(chǎn)生沉淀，同時能縮短血清融化時間。具體如下：

 

 

3. 關(guān)于胎牛血清的滅活

真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體，如果針對補體滅活的話，就不需要。其他情況根據(jù)實驗設(shè)計來決定。

4. 胎牛血清的濃度

胎牛血清通常是以2%～20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，混合后配成*培養(yǎng)基。

曾有文獻(xiàn)報道，不同胎牛血清濃度對細(xì)胞存在一定的影響，尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞。具體濃度需要用戶根據(jù)自己的實驗來確定，以既保證培養(yǎng)的效果，又避免血清的浪費。

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