細胞培養(yǎng)中最重要的步驟——無菌操作

細胞實驗室最常面對的難題就是：如何保持無菌。細胞一旦遭到污染,所有的實驗結果都會變得毫無意義。

結細胞污染的主要原因包括：操作技術不嚴格、試劑質(zhì)量不達標、大氣中孢子計數(shù)增加、養(yǎng)箱或操作臺使用和維護不當?shù)取?/span>

因此，在細胞培養(yǎng)過程中，操作者不僅要嚴格遵守標準的操作程序，同時還要特別注意新產(chǎn)品、新品牌、以及設備的清潔維護。同時，及時檢測并鑒定細胞是否被污染同樣至關重要。

實驗進行前，超凈臺以紫外燈照射 30 分鐘滅菌，以 70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面，并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，避免細胞間交叉污染。

實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，再次以 70 % ethanol 擦拭無菌操作臺面。實驗用品以 70% 乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域，一般不要再邊緣區(qū)域操作。

試驗臺、超凈臺、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等細胞培養(yǎng)環(huán)境被支原體污染，可引起細胞的污染。應定期對工作區(qū)域進行消毒。本文締一生物為您分析實驗室工作區(qū)域中支原體祛除的方法。

常用以下三種方法：

Mycoplasma OffTM是一款支原體噴霧劑，用于清除工作區(qū)域中的支原體。它起效快（10秒鐘即起效），安全無毒，對細胞不會產(chǎn)生不良影響，噴灑后，可再用干凈紙張擦拭即可。對于工作臺以及各種細胞操作的器具表面，均可使用。如果是需要避免沾染液體的電子設備，可使用Mycoplasma OffTM濕巾擦拭。

細胞孵箱、水浴鍋等有溫水的地方，也容易滋生支原體、細菌等。在循環(huán)水中倒入Water ShieldTM（1：200稀釋）即可有效地預防滋生，效果可持續(xù)1個月左右。

Mycoplasma OffTM對許多細菌、病毒也有預防和殺滅作用。