胎牛血清的相關(guān)知識(shí)你了解多少？

許多臨床和做科研的小伙伴們都要涉及到細(xì)胞培養(yǎng)，在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，血清無疑成為影響實(shí)驗(yàn)成功與否的重要因素，而在眾多血清之中，牛血清是最為常用的。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，其中含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。牛血清是一種成分復(fù)雜的混合物，而且血清的組成及含量通常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而存在差異。牛血清主要成分有蛋白質(zhì)，多肽類，激素類，其他成分 如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。

牛血清根據(jù)取材時(shí)間不同而有不同的區(qū)分。

胎牛血清：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清

（1）.特級(jí)胎牛血清：40納米過濾，內(nèi)毒素含量≤10EU， 血紅蛋白含量≤10mg/dl。

（2）.優(yōu)等胎牛血清：經(jīng)過3次100納米過濾，內(nèi)毒素含量≤25EU/ml，血紅蛋白含量≤25mg/ml。

（3）.標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清：3次100納米過濾，低內(nèi)毒素， 低血紅蛋白含量。

（4）.活性碳/葡聚糖處理血清：激素含量大大降低。

（5）.透析型胎牛血清：次huang嘌呤和胸腺核苷含量大大降低。

因此，如何在使用過程中保護(hù)這些因子的活性，達(dá)到最大的細(xì)胞培養(yǎng)效果，就需要正確地使用胎牛血清。

正確地使用胎牛血清可分為以下四個(gè)方面：

1. 正確儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融

1) 血清在-20°C凍存。

2) 血清避免反復(fù)凍融，以免降低因子活性。如一次用不完，應(yīng)進(jìn)行分裝。

3) 血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配"，配好的培養(yǎng)液，應(yīng)于一周內(nèi)用完。

4) 血清避免在4°C或更高溫度靜置過久，否則會(huì)破壞血清中有效活性成分，影響血清品質(zhì)。

2. 正確的融化

國(guó)際上流行的【血清融化三步法】可最大限度地保存血清中因子的活性，不會(huì)產(chǎn)生沉淀，同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。具體如下：

3. 關(guān)于胎牛血清的滅活

真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ]有形成有效補(bǔ)體，如果針對(duì)補(bǔ)體滅活的話，就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來決定。

4. 胎牛血清的濃度

胎牛血清通常是以2%～20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，混合后配成*培養(yǎng)基。

曾有文獻(xiàn)報(bào)道，不同胎牛血清濃度對(duì)細(xì)胞存在一定的影響，尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞。具體最佳濃度需要用戶根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)來確定，以既保證培養(yǎng)的效果，又避免血清的浪費(fèi)。