干細胞培養的發展歷程

1981年Kaufman等人[1]直接從小鼠囊胚的ICM 中成功獲得多潛能的胚胎干細胞（ES細胞）以來，自此之后，人們先后從豬、牛、兔等動物體內，分離得到ES細胞或類ES細胞系。

隨后的研究中，Thomsom 等人[2]建立了人類胚胎細胞系，科學家們開始關注于胚胎細胞的定向誘導分化，希望通過這類研究為治療退行性疾病提供組織、器GUAN移植的原材料。顯然，干細胞的體外培養是進行上述各項研究的前提與基礎。在干細胞的體外培養方面，培養基是其賴以生存的環境，哪怕是極微小的變化都會影響干細胞的增殖和分化[3]。

在隨后的研究中，科研人員發現，干細胞具有兩個特性：自我更新的能力以及多向分化的潛能。在體外培養時，實驗人員需要盡可能利用各種培養條件，維持干細胞的這兩大特性。因此要求ES細胞培養基中，除了一般體外培養所用到的基礎培養基，還應添加血清、LIF、β-巰基乙醇，L-谷氨酰胺等成分，隨后有發展出飼養層培養等方法，各種干細胞專用培養基、條件培養基也相繼問世[4]，豐富了干細胞培養方法與流程。

但目前市場上，干細胞培養專用的試劑盒，其中培養基和細胞因子價格高昂，使得培養成本大大增加，而且實際操作過程往往需要配合飼養層來培養，周期長，步驟繁瑣，對實驗者有較高的技術要求，因此很多實驗室培養干細胞的效果并不理想。

參考文獻：

［1］ Evans M J，Kaufman M H．Establishment in culture of plurpotential cells from mouse embryos ［J］．Nature， 1981，292：154-156．

［2］ T homson J A，Itskovits-elder J S，Shapiro S S，et al． Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts［J］．Science，1998，282（5391） ：1145-1148．

［3］ 楊 奇．胚胎干細胞的分離克隆［J］．西北農林科技大 學學報（ 自然科學版） ，2001，29（3） ：120-124．

［4］ 郭志林，王新莊，衛 木，等．影響昆明小鼠和 BALB／c 小鼠胚胎干細胞分離、克隆、傳代的若干因素［J］．中 國獸醫學報，2006，26（4） ：448-450．