細胞培養的實驗室對支原體污染預防的幾種方法

支原體的污染肉眼不易察覺，直到嚴重的階段才會出現培養基變色、細胞異常等情況。支原體可造成細胞代謝改變，基因表達譜發生變化，從而嚴重干擾實驗進程。本文締一生物為您分析細胞培養的實驗室對支原體污染預防的幾種方法。

因此，在細胞培養過程中，定期監測是否存在支原體污染，及時預防支原體污染是每個科研人員的工作之一。下面筆者給您推薦幾個支原體防控的產品，僅供參考。這些都是德國Minerva Biolabs公司出品，在國際期刊上也具有很高的引用率。

一、環境中的支原體污染的預防和清除

Mycoplasma OffTM是一款支原體噴霧劑，用于清除工作區域中的支原體。它起效快（10秒鐘即起效），安全無毒，對細胞不會產生不良影響，噴灑后，可再用干凈紙張擦拭即可。對于工作臺以及各種細胞操作的器具表面，均可使用。如果是需要避免沾染液體的電子設備，可使用Mycoplasma OffTM濕巾擦拭。

細胞孵箱、水浴鍋等有溫水的地方，也容易滋生支原體、細菌等。在循環水中倒入Water ShieldTM（1：200稀釋）即可有效地預防滋生，效果可持續1個月左右。

Mycoplasma OffTM對許多細菌、病毒也有預防和殺滅作用。

二、細胞培養中支原體污染的祛除

通常來說，被污染的細胞應該丟棄，以避免成為污染源。但對于珍貴的細胞，可使用Minerva Biolabs公司的Mynox®或Mynox Gold®。以往別的品牌的支原體清除劑，其實只是抑制劑，它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成，但無法殺除。Mynox®是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌，可與支原體膜特異性結合，破壞膜通透性，導致支原體膨脹破裂而死。使用Mynox®一般在2-3個小時即可完成清除任務。

Mynox Gold®是Mynox®的升級版，它通過四個療程產生作用。每個療程即細胞傳一代。它除了包括Mynox®，也包含復合抗生素成分。以往別的品牌的支原體清除劑只是針對支原體的抗生素成分，但也容易產生耐藥。Mynox Gold®將Mynox®和抗生素結合，即結合了二者的優點，又去除了二者的不足，因為有的細胞對Mynox®的治療不太適應，而Mynox Gold®要比Mynox®更加溫和，對細胞的毒性效應極小，因而更適用于脆弱的不太好養的細胞。

三、細胞培養中支原體污染的預防

Zell ShieldTM直譯過來是細胞擋箭牌，它不僅能殺菌，還可抑制支原體的蛋白和DNA合成，因而能避免支原體的污染。使用時按1：100的比例加到培養基中，即可使用。它是復合抗生素成分，支原體耐藥的出現幾率很低。

四、細胞培養中支原體污染的監測

可使用MB公司出品的Venor® Gem系列，常用的是一步法試劑盒（Venor® Gem OneStep），它采用靈敏的PCR方法，能識別常見的至少二十七種支原體。所有試劑均在一管內，為穩定的凍干粉形式，用緩沖液溶解后可直接使用。細胞上清取2l即可完成支原體的篩查。

總之，支原體雖然發生率高，但可放可控。以上僅僅列舉的是實驗室的情況，對于生物制藥企業，如果是病毒液中發現支原體的污染，也可以采用Mynox®進行清除。總之，支原體的檢測和預防已成為一項常規操作，這對保障細胞學實驗的順利進行，是非常重要的。