高效復蘇細胞有沒有什么秘訣？

細胞培養的開始，就是復蘇細胞。如何有條不紊地讓細胞從沉睡中蘇醒？今天就來給大家總結幾個實用小技巧，快點來get！

細胞復蘇流程：

1、將凍存的細胞從液氮罐中取出，立即放入37°C的水浴中進行融化，輕柔晃動，加速融化，直到小瓶中只剩下一小塊冰，時長應控制在1min中；

2、用70%乙醇擦拭瓶外后轉移無菌操作臺中，打開瓶蓋前，用酒精燈火焰對瓶口進行消毒；

3、將預加熱的新鮮完quan培養基滴入小瓶中。緩慢用移液槍吸取瓶中液體至15ml離心管中，加入適量濃度和體積的完quan培養基，輕柔混合均勻；

4、200 × g左右細胞懸浮液離心5-10分鐘。實際的離心速度和持續時間因細胞類型而異。棄掉上清，加入新鮮完quan培養基重懸細胞，并將其轉移到適當的培養容器和推薦的培養環境中。

細胞解凍流程圖

注意事項：

1、液氮溫度低，小心低溫對人造成的傷害，在液相中儲存的冷凍瓶在解凍時存在爆炸的風險，因此，取出凍存管的時候，要做好個人防護。

2、通常細胞集中儲藏在液氮中，取出時應迅速，避免溫差對其他凍存細胞造成影響。

3、復蘇細胞的核心技術，簡而言之就是快融，將在37°C水浴中快速解凍冷凍細胞(< 1分鐘）。

4、解凍時，凍存管先放入無菌一次性PE手套中，再放入水中融化，避免污染也方便操作。

5、用預熱過的培養基慢慢稀釋解凍的細胞。

6、解凍細胞后，在培養皿中培養時，應盡量維持高密度，以提高細胞存活率。

7、注意無菌操作，避免細胞發生污染。

細胞高效解凍的另一個成功秘訣，就是選擇一款優質血清！

Ausbian進口特級胎牛血清，有以下優點，可以盡可能幫助實驗者提高細胞實驗成功率：

1. 精選內毒素更低批次（≤3EU/ml）。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩定供應品牌。

實驗室有些細胞，需要長期培養、長期凍存，或者經常復蘇、經常培養的，血清會經常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康，都應該選用更低內毒素的血清，以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。

2. 新批次在試用前，提供試用服務，養細胞更放心。

3. 每個批次產量800-2000升，試用滿意的實驗室批號優先鎖定，保證大多數項目兩年不需換批次，細胞試驗數據穩定。

4. 每年按廠家生產順序，會有多批次平行供應，每個實驗室專屬批號管理，保證供貨穩定。

5. 為Ausbian血清用戶免費提供申報支持，具有完整的檢測報告，為各類項目的申報提供支持（同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學驗證等方面，提供更多免費延伸性技術幫助）。

6. 針對特殊科研項目，可提供3-5個平行批次，讓試驗人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務，為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護，按要求隨時發貨。

8. Ausbian血清從出廠，到實驗室，全程低溫冷鏈保護，確保血清無反復凍融。

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