細說《歐洲藥典》中『培養法』支原體檢測

近些年來，生物醫藥行業發展迅速，細胞治療、抗體藥物治療成為研究熱門。隨之而來生物制品安全控制，成為相關從業者關注的焦點。

支原體因其隱蔽性高、分布廣泛的特點，一直以來，在檢測方面存在著困難。但對于涉及細胞培養的生物制品等工藝過程，支原體檢測勢在必行。各國藥典中，都對相關生物制品的支原體檢測做出了規定。本期內容，我們就來詳細講講，《歐洲藥典》中支原體檢測方法——培養法。

《歐洲藥典》中，對于培養法有許多限制與規定，總結為如下幾點：

1、確保在所選擇的培養條件下可能存在于待檢測產品中的少量支原體生長

2、液體介質必須含有酚紅。

3、所選擇的培養基范圍至少能滿足以下幾種微生物生長的營養需求，即滿足測試菌株的生長條件，對每一批新培養基進行營養特性測試。

培養條件如下：

液體培養：在35-38°C的密封容器中培養。

固體培養：在35-38°C的微親氧條件下(含5- 10%二氧化碳的氮氣和足夠的濕度以防止瓊脂表面干燥)培養。

《歐洲藥典》中規定，支原體培養法檢測，所用的需要進行營養特性實驗（特異性驗證）、抑制物質實驗（耐用性）的驗證，才有說服力。

另外，待檢測的樣品也需要進行一定處理。

從實驗原理看，培養法檢測支原體有以下特點：

優點：靈敏度高

缺點：只能檢測活的支原體

藥典中提到，經過驗證，NAT法可以替代培養法進行支原體檢測。

德國MB的支原體qPCR檢測試劑盒：Venor®Gem qEP，通過《歐洲藥典》方法學驗證，涵蓋培養法的同時，規避其短板。