提高細胞培養效率的兩個關鍵點

細胞體外培養技術的應用，是人類開啟生命奧秘大門的鑰匙。該項技術的發展，科學家們能夠脫離供體的情況下，在實驗室中，研究并分析各種細胞的生命活動。高效的細胞培養來之不易，操作過程的實際情況十分復雜，存在諸多可能會影響培養效率的因素，包括實驗環境、實驗材料的選擇等。

一、實驗環境

細胞培養環境需要嚴格無菌，甚至是空氣都要使用新風系統進行過濾。對于墻壁、地板、桌面、超凈工作臺，更是要定期清潔。德國Minerva Biolabs公司的Mycoplasma-off™ Wipes和Mycoplasma-off™直接用于實驗環境、物品、儀器、設備的清潔。該試劑無需稀釋，噴灑或擦拭后自然風干，即可高效清除環境中的微生物污染。

細胞培養環境中，培養箱水槽，水浴鍋經常會有支原體以及各種細菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及時，水槽中的水源即會成為細胞污染的重要來源。保持水槽的潔凈，對細胞培養的順利進行非常重要。推薦：全球眾多實驗室日常都在使用德國MB公司生產的Water Shield™支原體污染防護劑（水槽用）。Water Shield™可持續作用四周，使水源避免受到支原體、細菌、真菌、霉菌、孢子的污染。按1:200的比例，加到水浴鍋或培養箱水盤的無菌水中即可

二、實驗材料的選擇

所培養的細胞，來源應清晰，確保無污染。對于培養試劑及耗材，也盡可能選擇無菌的。

細胞離不開高品質血清。而胎牛血清作為天然的培養基，在培養實驗中占有重要位置。選擇胎牛血清的重要指標之一，就是考察內毒素的含量。

內毒素在細胞傳代增殖過程中，會直接參與細胞凋亡的過程，一定劑量下，會給細胞培養帶來很多問題，特別是免疫細胞和干細胞，例如：誘導免疫細胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細胞集落的形成等。因此，血清中內毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長和傳代；反之，內毒素含量過高，會直接導致細胞狀態不良，提前老化，甚至死亡。

基于以上研究，用于細胞培養的牛血清，要通過嚴格的內毒素水平檢測，每一批血清都有完整的檢測報告，通過內毒素的檢測數值，對血清的品質進行分級和評估。

目前國際通用的分級方法，均以內毒素含量的高低來確定，內毒素含量越低，血清的級別就越高，以胎牛血清為例：

當血清中內毒素含量≤10EU/ml時，此血清為特級胎牛血清；

當血清中內毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時，此血清為優級胎牛血清；

當血清中內毒素含量≥25EU/ml時，此血清為標準級胎牛血清；

Ausbian®進口特級胎牛血清，澳洲血源，均經過嚴格篩選， 目前所有批次內毒素都低于3EU/ml，其中有的批次可以低至≤1EU/ml。更低的內毒素血清，更利于細胞的生長和傳代。