非包膜病毒如何清除支原體污染？

細(xì)胞培養(yǎng)物被支原體污染是經(jīng)常發(fā)生的。出于科學(xué)、安全和經(jīng)濟(jì)的原因，在基礎(chǔ)研究、診斷和生物技術(shù)生產(chǎn)中，必須從受污染的細(xì)胞培養(yǎng)物中消除支原體。在細(xì)胞培養(yǎng)物中消除、滅活或抑制支原體常用的方法是用抗生素治療。然而，一般來(lái)說(shuō)，抗生素治療不能持久、成功地消除污染的支原體。此外，抗生素的細(xì)胞毒性可能對(duì)真核細(xì)胞造成不良的副作用，并可能促進(jìn)耐藥支原體菌株的發(fā)展。Mynox®是第一種生物試劑，通過(guò)誘導(dǎo)微生物死亡來(lái)消除支原體污染。它已經(jīng)被證明是有效的，只有一個(gè)治療。Mynox®的活性基于其生物物理特性，這使得耐藥菌株的不易產(chǎn)生。

如何處理非薄膜病毒中污染的支原體？德國(guó)MB公司生產(chǎn)的Mynox細(xì)胞支原體清除，不僅能清除細(xì)胞中的支原體，對(duì)于非包膜病毒也有效。

冷凍或新鮮等量的細(xì)胞和無(wú)細(xì)胞碎片的病毒懸浮液可以處理。病毒滴度不影響治療的成功。

3.1細(xì)胞制備及消泡液

1.使用1.5 ml帶安全鎖的無(wú)菌反應(yīng)管配制消毒液。

2.加入1 ml不加FCS的細(xì)胞培養(yǎng)基。

3.加入100µl Mynox®。

4. 將含有高達(dá)8% (v/v) FCS的125µl病毒原液轉(zhuǎn)移到混合物中。漩渦。包括病毒原液的處理混合物的總體積為1.225 ml。

注意:在旋轉(zhuǎn)過(guò)程中，請(qǐng)確保消除液濕潤(rùn)離心機(jī)管的整個(gè)內(nèi)表面。

3.2 Mynox®的處理和去除

1.在室溫下將消去液孵育2小時(shí)。

2.將處理混合物在培養(yǎng)基中稀釋1:10，停止反應(yīng)。這可以通過(guò)使用消除混合物感染亞融合宿主細(xì)胞培養(yǎng)物以同時(shí)繁殖無(wú)支原體病毒培養(yǎng)物來(lái)實(shí)現(xiàn)。最終體積應(yīng)為消泡液體積的10倍。

注意:感染前檢測(cè)宿主細(xì)胞系是否受支原體污染。