如何預防細胞培養體系發生真菌污染？

真菌污染會嚴重影響細胞代謝、生長和活力，并降低轉染效率，從而影響結果的可重復性。

真菌污染的主要來源是通過空氣傳播途徑、非無菌設備和試劑，或不良的無菌技術。真菌主要以懸浮液的形式在培養基中生長，但也可以附著在細胞或生長血管上。在顯微鏡下，它們可以被識別為培養基表面的小孤立菌落，并通過延長生長導致培養基渾濁。在污染的晚期階段，真菌可能會增加細胞培養基的 pH 值，導致含酚紅的培養基看起來色調較淺。

真菌污染的具體表現：

培養液變化：培養細胞受真菌污染后，培養液中可能會漂浮著白色或淺黃色的小點，有的呈散在生長。這些真菌污染在初期可能不會引起培養液的明顯混濁，但隨著時間推移，污染可能逐漸加重。

鏡下觀察：在倒置顯微鏡下，可以觀察到絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養基中，有的呈鏈狀排列。對于念珠菌和酵母菌等真菌，它們可能呈卵圓形態，散在于細胞周邊和細胞之間生長。

一般遇到細胞被真菌污染的情況，我們建議直接將細胞丟棄，并對培養環境進行清潔消毒。如果遇到真菌污染早期，且不能隨意丟棄細胞的情況，建議使用細胞專用的真菌清除試劑，例如：德國MB公司生產的 Funox®，該真菌祛除試劑并專門設計用于預防并清除真菌感染。它由納他霉素組成，納他霉素是一種由納塔氏鏈霉菌生產的多烯抗真菌抗生素。納他霉素的抗真菌活性取決于它們與各種真菌的細胞膜甾醇的結合。

Funox®優勢：

1、特異性強

Funox® 是一種用于培養基的添加劑，其中含有納他霉素，納他霉素是一種天然存在的抗菌劑，可保護細胞培養物免受各種常見真菌和酵母污染物的侵害。

2、應用范圍廣

Funox® 可用于長期用于細胞培養，也可用于預防新鮮制備的原代細胞培養物中的污染。

3、無細胞毒性

到目前為止，按照說明書使用該產品，尚未報告對各種細胞系的細胞毒性作用。

4、簡單易用

Funox® 可以直接添加到細胞培養物的大多數燒瓶或板中，優選在更換培養基時或傳代細胞后

5、穩定性

Funox®應在37°C孵育7天后換新，以達到最大的保護。

6、推薦用途

Funox® 適用于研究和工業中，用于細胞培養物和生物制品的直接測試。不建議用于臨床診斷。需要注意的是，我們建議在污染晚期階段的情況下丟棄細胞培養物。