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支原體污染細胞的檢測方法及防治措施

更新時間:2025-01-15  |  點擊率:584
  支原體污染細胞是細胞培養和生物實驗中常見的一個問題。支原體(Mycoplasma)是一類非常小的原核生物,因其沒有細胞壁,結構簡單,容易在細胞培養環境中生長和繁殖,且通常不易被常規的細胞培養檢測方法察覺。支原體污染不僅會影響細胞的生長和功能,還可能導致實驗結果的偏差,甚至影響實驗的重現性。為了保證細胞培養的質量和實驗結果的可靠性,了解支原體的特性、污染機制及其防治方法是非常重要的。
 

 

  支原體污染細胞的檢測方法:
  1.顯微鏡檢查法:利用染色法(如DAPI染色法)和熒光顯微鏡觀察細胞中是否存在支原體。這種方法可以直接觀察到支原體的存在,但靈敏度較低,且不適用于大規模篩查。
  2.培養法:將培養物接種于特殊的培養基上,進行培養觀察。如果支原體存在,它們會在培養基中生長,并在幾天內形成典型的菌落。這種方法對需要高靈敏度的檢測較為有效,但周期長,且操作復雜。
  3.PCR檢測法:通過PCR擴增支原體基因序列,如16SrRNA基因,可以敏感且快速地檢測支原體污染。這是目前常用的支原體檢測方法,具有較高的靈敏度和特異性。
  4.酶聯免疫吸附法(ELISA):該方法通過檢測支原體產生的特異性抗原或抗體進行檢測,雖然靈敏度較高,但仍不如PCR方法廣泛應用。
  5.免疫熒光法:利用特異性的抗支原體抗體進行免疫熒光標記,可以在細胞培養物中檢測到支原體。
  支原體污染細胞的防治措施:
  1.嚴格的無菌操作:培養過程中必須嚴格執行無菌操作,減少污染源。使用無菌的培養基、試劑以及滅菌處理過的實驗工具,避免交叉污染。
  2.定期檢測細胞:細胞培養的定期檢測是確保無支原體污染的有效方法。尤其是在長期培養的細胞系中,應定期進行支原體檢測。
  3.培養環境的控制:保持細胞培養室的清潔,定期消毒并保證通風良好,減少空氣中細菌和支原體的傳播。
  4.使用抗支原體藥物:有些實驗室在細胞培養中會加入一些抗支原體藥物,如金霉素、磺胺類藥物等,以防止支原體污染。然而,這些藥物不能全杜絕支原體污染,只能減緩其增長,且長期使用可能對細胞有不良影響。
  5.更換污染細胞系:一旦發現支原體污染,應該立即將受污染的細胞系隔離并處理掉,避免污染擴散。對于已經被污染的細胞,常常需要清除并重新從沒有污染的來源建立細胞系。
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