干細胞培養(yǎng)基是干細胞體外培養(yǎng)的核心要素,其配方設(shè)計直接影響干細胞的生長、增殖、分化及功能維持。
干細胞培養(yǎng)基的核心成分:
基礎(chǔ)培養(yǎng)基
常用類型:DMEM/F12、α-MEM、RPMI-1640等,提供氨基酸、維生素、無機鹽等基礎(chǔ)營養(yǎng)。
特點:DMEM/F12因兼顧高糖與低糖需求,適用于多種干細胞類型。
血清及替代物
胎牛血清(FBS):傳統(tǒng)培養(yǎng)基中添加10%-20%,提供生長因子、激素等,但存在批次差異和污染風險。
無血清替代物:如人血小板裂解物(hPL)、化學成分限定培養(yǎng)基(CDM),減少異源蛋白干擾,提高實驗可重復性。
生長因子與細胞因子
關(guān)鍵因子:bFGF(促進增殖)、EGF(維持干性)、TGF-β(調(diào)控分化)、LIF(維持多能性)。
作用:通過信號通路調(diào)控干細胞命運,例如bFGF激活MAPK/ERK通路促進增殖。
其他添加劑
緩沖體系:碳酸氫鈉(維持pH 7.4)、HEPES(增強pH穩(wěn)定性)。
谷氨酰胺:提供能量,但需-20℃保存以防止降解。
抗生素:如青霉素-鏈霉素,防止細菌污染,但長期使用可能誘導耐藥性。