維生素測定培養基生產和使用容易遇到的問題

　　

　　微生物法測定食品中的維生素B12、葉酸是國家食品安全標準中的方法。因其檢出限低、靈敏度高、測定結果準確可靠，受到了國內的廣泛青睞。在該方法中要用到三種培養基：貯存菌用培養基、接種菌用培養基、維生素測定用培養基。其中維生素測定用培養基重要，也為關鍵。

　　

　　鑒別培養基在培養基中加入某種試劑或化學藥品，使難以區分的微生物經培養后呈現出明顯差別，因而有助開快速鑒別某種微生物。這樣的培養基稱之為鑒別培養基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍培養基就是一種常用的鑒別性培養基。半固體培養基指在液體培養基中加入少量的凝固劑而配制成的半固體狀態的培養基。脫水培養基又稱預制干燥培養基，指含有除水分外的一切成分的商品培養基。

　　

　　維生素測定培養基生產和使用常見問題：

　　

　　1.維生素測定培養基能用肉眼判斷其pH值嗎？

　　

　　答：維生素測定培養基中酚紅的含量與普通培養基中的酚紅含量不同，不能通過肉眼觀察或通過經驗來判定pH值，建議使用pH計進行測定。

　　

　　2.維生素測定培養基的緩沖系統是什么？

　　

　　答：平衡鹽一般是由無機鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統、Earle′s系統、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統等。

　　

　　3.谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的配制方法是什么？

　　

　　答：以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制為例：稱取L-谷氨酰胺2.92g，加注射用水100ml，充分攪拌混勻。用0.2μm濾膜正壓過濾除菌。溶液應在4℃下避光保存，2周內使用。

　　

　　以7.5%NaHCO3的配制為例：稱取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過濾除菌。

　　

　　4.什么培養基中可以省去加酚紅？

　　

　　答：酚紅在培養基中用作pH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。酚紅本身對生物制品質量并不會產生影響，可以通過純化技術去除，但酚紅在無血清培養基可能帶來胞內鈉/鉀失衡，影響細胞生長，當然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養基中必需的一種成分，很多國外的疫苗或抗體生產企業在生產過程中都使用無酚紅培養基。