應對破壞細胞的支原體~qPCR支原體檢測試劑來幫你

織細胞培養工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環境污染；嚴格實驗操作；細胞培養基和器材要保證無菌；在細胞培養基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。

德國MB公司qPCR支原體檢測試，該試劑盒采用熒光定量PCR技術，是已建立的檢測方法，能一次檢測歐洲藥典（EP2.6.7）和日本藥典（JP G3）提到的所有支原體物種，并且能與大多數儀器配合使用。

 

該試劑盒針對支原體基因組中的高度保守區，具有快速、耐用和靈敏的特點。

該試劑盒的設計滿足歐洲藥典和日本藥典對于不同類型樣本（如軟骨細胞、血清、細胞培養上清）在DNA抽提后的檢測標準。可直接檢測細胞上清（研究領域），或者先對細胞培養物富集，或先抽提DNA。該試劑盒*符合EP2.6.7和JP G3的要求。

檢測原理：

該試劑盒擴增柔膜體對應的16S rRNA上的特異序列， 而真核細胞和其他細菌DNA不會被擴增。

試劑盒說明書同時包括細胞培養上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程，包括對DNA抽提和對樣本體積的規定。整個檢測小于3小時。并且與ELISA、熒光染色和培養法不同的是，無須活支原體。和一些生化和細胞學方法相比，PCR具有更高的靈敏度和準確性。

試劑盒包含所有必要的PCR組分，

內控DNA可用于鑒定PCR抑制或DNA抽提問題帶來的假陰性。內控DNA可直接加到PCR預混液里，或加到DNA抽提之前的樣本中。它可用于驗證DNA抽提和qPCR擴增過程。它可從Minerva廠家購買（貨號11-9905）。內控對照的擴增結果在560nm檢測（HEX通道），而支原體的擴增在520nm檢測（FAM通道）。

試劑盒包括dUTP，它替代dTTP，方便用尿嘧啶DNA糖基酶（UNG）監視假陽性。該試劑盒不包含UNG。