血清使用小技巧 | 如何保證血清活性？解凍和儲存方法很重要

剛到貨的血清應該怎樣儲存？

血清到底要怎樣解凍才能保證活性？

血清在4℃冰箱能放多久？

作為一名細胞培養大戶，你是不是經常會糾結上面這些問題？畢竟血清這種金貴的東西，可得好好珍惜，一個不小心，就可能導致實驗失敗，免不了要被導師責備。

那這些問題到底應該怎樣解決？有沒有標準答案？身為一個資深的代理商，關于血清的儲存和解凍問題我們可是有好好研究過的。

如果你也存在同樣的疑惑，那就請接著往下看吧。

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常規儲存

首先，剛到貨的血清，趁著它還凍手，趕緊放進-20℃冰箱中，避免反復凍融。當然，如果你的課題組不差錢，-80℃冰箱空間充足，把血清儲存進去也是沒有問題的。

穩了

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如何解凍

很多同學會說，不就是解凍血清嘛，這題我會！

放4℃過夜

emmm……怎么說呢，直接在4℃冰箱里過夜融化的方法，雖然很多人在這么用，但還是有一些潛在的風險的。

我們都知道，在血清這種混合物中，融化速度：蛋白質等干物質>水這類溶劑，所以蛋白質會先溶解析出，而水還是結成冰的狀態，導致瓶子中間會出現一根透明的冰柱，而周圍則會呈現上黃下紅的分層渾濁液的狀態，在使用過程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過高等問題，影響細胞生長。

更重要的一點是，血清中珍貴的生長因子等活性物質，它們在解凍過程中，有著與細胞復蘇類似的經歷，都需要快速解凍才能盡可能保留生物活性。顯然，4℃過夜這樣的長時間處理，很有可能會導致一部分「營養成分」的損失，影響細胞生長。

所以，為了更好地保留血清中的活性成分，使細胞培養更穩定，我們推薦使用三步法溶解，具體方法見下表，有需要的同學可以截圖保存。

如果是儲存在-80℃的血清，則需提前幾天先轉移至-20℃冰箱中（至少24小時），再使用三步法溶解，避免溫差過大使血清失活。

注：此方法國際通用，適用于所有培養基，在水浴過程中，血清的平面要浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動瓶身，使血清混勻，但搖動中盡量不要產生泡沫！

解凍血清后，可以根據實驗需求，將其分裝，保證每一份夠一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續儲存。需要配制培養基的時候，再從-20℃冰箱中取出一管來解凍使用（盡量能全部配成培養基，不要有剩余），可以有效避免反復凍融的問題（遵循現用現配、現配現解凍的原則）。配好的培養基可以放到4℃冰箱進行儲存。

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4℃存放時間

看到這里，問題又來了，配好的培養基，或者剩下的那一點點血清，能在4℃冰箱里放多久呢？

先給出我們認為比較合理的答案，再來解釋原因：

7天

一般情況下，已經解凍的血清，無論是配成完quan培養基還是在冰箱里備用，都不要超過一周（7天），原因也很簡單，存放太久，生長因子等物質容易失活，而且比較容易受到污染，影響實驗結果。

不知道今天這期內容有沒有解決大家的疑惑，無論是國產還是進口血清，都不算便宜，這么貴巴巴的試劑，還請小心使用，物盡其用，可不能讓銀子白花！